1000 Da 分子量的测定方法
1、样品的提取:
准确称取1g经细粉碎的发酵豆粕样品,20 mL pH 8.0缓冲液(Tris-HCl)室温下振荡提取1 小时;
2、将上述溶液于低温高速离心(8000 g,20 min),精确吸取1 mL上清液采用凯氏定氮法测定含氮量A ;
另外精确吸取2.5 mL上清液于超滤管(日本三光纯药公司,截留分子量为1000 Da),4000 rpm离心20 min,
测定通过超滤膜的清液体积V,并测定含氮量B。
3、1000 Da分子量含量计算:
BV/2.5 A *100%